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荧光体视显微镜的构造及性能作用

发布人:发布时间:2014/9/10

    荧光体视显微镜就其构造来说,同一般显微镜相比具有许多特点,下面按部件分别加以叙述。


    1.照明器


    在荧先体视显微镜中,光在一系列滤光片上的损失是相当大的,只有很少的激光发光最终交为荧光。在大多数情况下荧光的最终产量只占光源发射光量的0.1%或者更低,因此荧光显微镜必须具有很强的光源。所有的白炽灯在光谱的蓝紫范围内只有很少的光产量,而这个范围正是大多数荧光染料故激发的区域,因此自炽灯不适用于荧光体视显微镜,现在在荧光显微镜中经常使用100W和20OW的离压汞灯成高压氙灯,它们在近紫外和可见光的蓝紫范围内有较强的发射,高压汞灯在光谱的365.404,436,546,577nm波长有发射峰,高压氙灯在紫外和可见光范围内有连续发射光谱,尽管这两种气体放电灯需要复杂的附属设备,并且寿命较短、价格昂贵,但是它们在荧光体视显微镜中已经占有不可替代的位置。


    超高压汞灯(或氙灯)的灯饱用对紫外光有很好通透性的石英玻璃制作。中间呈球形,内充一定数量的汞(氙灯)。工作时两个电板间放电,引起汞(或氙)蒸发,灯内气压迅速上升,可达50-70个标准大气压,灯的亮度可达2万熙提。


    由于这种气体放电灯放出大量的热量,因此灯室必须有良好的散热条件,工作室温度也不宜太高。这种灯启动一次。工作时间越短,灯的寿命则越短,一般启动后至少20分钟才能关闭,注意尽量减少启动次数。另外由于工作时灯内压力很离,紫外线强烈。因此灯必须置于坚固的灯室之内,以免伤害人的眼睛,另外在万一暴躁时不致伤人。


    2.集光器


    在荧光体视显微镜中,原来住用的是一般的明视野集光器。为了在观察时能把最大强度的光聚集在标本上,通常集光器的孔径应尽可能的大。由于物体的荧光在理论上可以被当作自发光体,因此集光器像的质量在荧光体视显微镜中实际上是不重要的,一个简单的阿贝氏集光器就可以得到良好的效果。当用油浸系观察时,一般使用数值孔径在1.0以上的集光器,同时还必须使用对紫外光吸取很少的特制无荧光浸油,并且使用使用集光器浸润。此外,这种浸润还可以使用重蒸水或无荧光甘油。


    目前暗视野集光器在荧光体视显微镜中的应用日益广泛,并有取代明视野集光尽的趋势。达足因为使用暗视野集光器时,激发光不能直接进入物镜。并且除散射光外,激发光也不进入目镜,这就使得激发滤片可以大大减薄,从而显著增大激发光的强度。而且阻断滤片也可以很薄,这就增强了荧光图像的亮度和反差,提高了像的质量,观察也比较方便。

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